هناك طرق عديدة لقياس نمو البكتيريا ، وإحدى الطرق أكثر تعقيدًا من الأخرى. على الرغم من أنه في بعض الأحيان يجب تجاهل اتساق القياس ، إلا أن أسهل طريقة كافية لقياس نمو البكتيريا بدقة ، لذلك غالبًا ما يتم استخدامها. أكثر الطرق شيوعًا هي مراقبة وحساب البكتيريا ، وقياس الكتلة الجافة أو الرطبة ، وقياس مستويات التعكر / التعكر. يجب أن يحتوي مختبر مدرستك على الأدوات والمعدات اللازمة لإجراء واحدة على الأقل من هذه التجارب.
خطوة
طريقة 1 من 3: مراقبة البكتيريا الحية
الخطوة 1. تحضير المكونات
هناك العديد من الأدوات الخاصة التي تحتاج إلى التحضير وقد لا تكون متوفرة في معمل الأحياء. قم بإعداد جميع المعدات والحاويات قبل إجراء التجربة حتى لا يكون هناك متاعب أثناء العملية. ستحتاج إلى معرفة كل مكون يتم استخدامه على الفور ، والمصطلحات الأساسية لهذه التجربة.
- جهز غرفة العد. يحتوي على حجرة مدمجة وزجاج مجهر وميكروسكوب لذلك يسهل إعداده واستخدامه. يمكنك شرائه من معمل أو متجر مستلزمات المدرسة. يجب أن تحتوي هذه الأداة على تعليمات ترشدك خلال العملية برمتها.
- تحضير كوب سكب أو كوب انتشار. تسمح لك كلتا الحاوية بمراقبة البكتيريا الموجودة بداخلها.
- الثقافة مصطلح يستخدم لوصف نمو الكائنات الحية في التجربة.
- المرق هو وسط سائل تنمو فيه الثقافة.
الخطوة 2. استخدم لوحة الصب أو طريقة لوحة الانتشار
يمكنك أيضًا وضع البكتيريا مباشرة على الطبق لمشاهدتها باستخدام المجهر. صب المزرعة على صحن وضعها تحت المجهر. مراقبة عدد الخلايا البكتيرية الموجودة.
الخطوة الثالثة: تأكد من أن جرعة التركيز صحيحة
إذا كان هناك الكثير ، فسوف تتراكم البكتيريا على بعضها البعض وقد تخطئ في التقدير. تمييع الثقافة عن طريق خلط المزيد من المرق. إذا كان هناك عدد قليل جدًا ، فلن تكون نتائج الحساب دقيقة. صفي المرق باستخدام نظام الترشيح.
الخطوة 4. عد البكتيريا
الخطوة الأخيرة هي عد البكتيريا واحدة تلو الأخرى. انظر من خلال العدسة المكبرة في غرفة العد واكتب عدد البكتيريا التي تراها. قارن النتائج بنتائج الاختبارات الأخرى.
طريقة 2 من 3: قياس الكتلة الجافة والرطبة
الخطوة الأولى: تأكد من حصولك على المعدات المناسبة
تستخدم هذه الطريقة معدات باهظة الثمن ووقتًا طويلاً. إذا لم يكن لدى مختبرك المعدات التي تحتاجها ، فمن الجيد استخدام طريقة أخرى. ومع ذلك ، إذا كان مختبرك مجهزًا جيدًا بما فيه الكفاية ، فإننا نوصي بهذه الطريقة لأنها توفر نتائج أكثر اتساقًا. في هذه الطريقة سوف تحتاج إلى:
- فرن الحمل الحراري بالجاذبية الهيدروليكية
- حاوية وزن مصنوعة من الألمنيوم
- مجموعة قوارير (زجاجات مختبرية)
- جهاز طرد مركزي (جهاز طرد مركزي) أو نظام ترشيح معمل
الخطوة الثانية: تأكد من وجود المزرعة في القارورة
أضف الثقافة إلى اليقطين. في هذه المرحلة ، يجب أن تكون الثقافة عبارة عن مرق ، على الرغم من أنه سيتم فصلها مرة أخرى لاحقًا.
الخطوة 3. جفف حاوية وزن الألمنيوم في فرن المعمل
بدلاً من ذلك ، يمكنك استخدام غشاء مرشح أسيتات السليلوز بقطر 47 ملم وحجم مسام 0.45 ميكرومتر. مهما كانت حاوية الوزن التي تستخدمها ، قم بوزنها لأنها ستحتاج إلى خصمها لاحقًا عند وزن الخلايا البكتيرية.
الخطوة 4. قلب المزرعة في الدورق حتى يتم مزجها بشكل متساوٍ
ستغرق الخلية بشكل طبيعي بسبب الجاذبية وستحتاج إلى تحريكها لتنتشر بالتساوي في القارورة. بهذه الطريقة ، يمكنك الحصول على المزيد من العينات.
الخطوة 5. استخدم جهاز طرد مركزي لفصل الخلايا البكتيرية عن المرق
تقوم هذه الأداة بتدوير القارورة وتوازنها بسرعة بحيث تقوم بتصفية المرق وتترك المزرعة في الدورق.
الخطوة 6. اكشط معجون اليقطين وضعه في وعاء وزن
تخلص من المرق لأنك لم تعد بحاجة إليه. ومع ذلك ، لا تتخلص من اليقطين فقط لأنه سيظل مستخدمًا.
الخطوة 7. اشطف آلة الطرد المركزي واسكب ماء الشطف في الحاوية
أسقط ماء الشطف في الدورق على الخلايا البكتيرية للحصول على الوزن الرطب.
الخطوة 8. ابحث عن الوزن الجاف
لقياس الوزن الجاف ، ضع الحاوية في الفرن وجففها في درجة حرارة 100 درجة مئوية لمدة 6-24 ساعة وفقًا لتعليمات الفرن و / أو حاوية الوزن المستخدمة. تأكد من أن درجة الحرارة ليست مرتفعة جدًا حتى لا تحترق البكتيريا. قم بوزن البكتيريا عند الانتهاء ، ولا تنس تقليل النتيجة بوزن حاوية الوزن.
طريقة 3 من 3: قياس التعكر
الخطوة 1. تجهيز المعدات اللازمة
ستحتاج إلى مصدر ضوء ومقياس طيف ضوئي. يمكن الحصول على كلاهما من متاجر مستلزمات المعامل. يجب أن يحتوي مقياس الطيف الضوئي على تعليمات ستوجهك في استخدام الأداة وفقًا للطراز الذي لديك. سعر مقياس الطيف الضوئي ميسور التكلفة للغاية وسهل الاستخدام بحيث يصبح أحد أكثر الطرق شيوعًا لقياس نمو البكتيريا.
الخطوة 2. إضاءة العينة
وفقًا لمصطلح ليمان ، فإن التعكر هو مستوى تعكر العينة. تحتاج إلى الحصول على رقم قياس التعكر ، والذي يتم قياسه بوحدة NTU (وحدة قياس التعكر Nephelometric Turbidity Unit). يجب معايرة هذه الأداة قبل أن تتمكن من قياس العينة بدقة.
الخطوة 3. سجل النتائج
تتأثر العكارة بعدد البكتيريا في العينة. سيخبرك مقياس الطيف الضوئي أيضًا بنسبة الإرسال (٪ T). سيزداد هذا الرقم إذا انخفض العكارة. قارن النتائج بنتائج الاختبارات الأخرى لقياس نمو البكتيريا.
تحذير
- نظرًا لأنك تتعامل مع مستعمرة بكتيرية ، اتخذ الاحتياطات من خلال ارتداء معدات السلامة مثل نظارات السلامة والقفازات. من الجيد أيضًا ارتداء قناع ، خاصة إذا كنت لا تعرف نوع البكتيريا التي تجري دراستها.
- اتخذ الاحتياطات اللازمة قبل التعامل مع أي نوع من البكتيريا ، حتى النوع غير الضار. تأكد من تغطية جميع الجروح المفتوحة على جسمك بالكامل قبل البدء.
